histoloji

Laboratuvarda histolojik incelemenin hazırlanması

Histoloji (dan antik Yunan ἱστός histos , Almanca , dokuya ' ve -logie , Yunan λόγος logolar veya 'öğretim') Histoloji olan bilim ve biyolojik dokulara . "Bitki ve hayvan dokularının oluşum ve yapısının belirli işlevlerle ilişkili olarak incelenmesi" olarak tıp ve biyolojinin bir dalıdır . Daha geniş anlamda histoloji, mikroskobik anatomiyi ifade eder . Histopatoloji hastalıklı doku değişiklikleri bilimidir.

Doku örnekleri histolojide incelenir. Bu amaçla mikrometre inceliğinde renkli doku kesitleri üretilir ve ışık mikroskobu kullanılarak değerlendirilir. Çok daha ince kesitlerin (0,01–0,5 µm) elektron mikroskobik incelemesi esas olarak araştırma alanının bir parçasıdır.

Doku incelemeleri erken teşhis: tıpta çeşitli amaçlara hizmet tümörler (örneğin gastrik biyopsi), (/ selim habis), tümörlerin sınıflandırılması, metabolik hastalıkların ve paraziter, bakteriyel, enflamatuar hastalıklar, bir tedavi seçimi ve çok daha yardım saptanmasını. Bulgular doku yapılarının görünümü ve renklendirme davranışı temelinde yapıldığından, morfolojik tanıdan söz edilir .

Histolojik çalışma için numune materyali, cerrahi numuneleri (ör. mide, bağırsaklar, böbrekler), numune eksizyonlarını (ör. doğum lekeleri, tendonlar, kistler) ve biyopsileri (ör. mide, bağırsak, meme dokusu biyopsilerini) içerir. Modern teknolojinin yardımıyla küçük doku parçaları (1-2 mm) üzerinde ince doku tanıları yapılabilmektedir. Bu mikro-invaziv yöntemler hastaya karşı naziktir ve genellikle önleyici muayeneler sırasında gerçekleştirilir.

Bir akciğerin histolojik bölümü, pulmoner veba

Öykü

boyama tekniklerinin geliştirilmesi

Marcello Malpighi (1628-1694), hayvan organlarını ve bitkileri mikroskop altında inceleyen ilk kişilerden biriydi. Henri Louis Duhamel du Monceau (1700-1782), hayvan kemiklerinin kök boya bitkisinden (Rubia tinctorum) elde edilen kök boya ile renklendirilebileceğini keşfetti . Doğal preparatlar büyük ölçüde renksiz olduğundan ve incelenecek doku yapılarının optik yoğunluğu genellikle büyük farklılıklar göstermediğinden, boyama yöntemlerinin geliştirilmesi histolojinin daha da geliştirilmesi için belirleyici olmuştur. 1838'de Christian Gottfried Ehrenberg , protistlerin (daha sonra infusoria olarak adlandırıldı) lekelenmesi ve mikroskobik gözlemi için karmin kullandı . 1849'da Heinrich Göppert ve Ferdinand Julius Cohn , kök boya ve karmin boyalarını kullanarak bitki hücrelerindeki protoplazmik akışı inceledi . 1855 civarında anatomist Joseph von Gerlach histolojik boyama tekniklerini daha da geliştirdi . Karmin kullanarak hayvan hücrelerinde hücre çekirdeklerinin boyanmasını tanımladı .

1863'te Heinrich Wilhelm Waldeyer , sinir hücrelerinin hematoksilen boyaması için kan ağacı ağacının ( Haematoxylum campechianum ) bir ekstraktını kullandı . Bir diğer önemli adım ise Paul Ehrlich tarafından anilin boyalarının kullanılmasıydı ; 1879'dan 1894'e kadar bu olasılıkları mükemmelleştirdi.

Histolojinin kökeni

Histolojinin kurucusu , 17. yüzyılda zaten yaygın olarak bilinen mikroskop olmadan insan vücudundaki 21 doku tipini tanımlayan Xavier Bichat (1771-1802) 'dir. Histopatolojinin gelişimi, 1838'de kanserin doğası ve yapısal özellikleri hakkında bir kitap yayınlayan Johannes Müller'e (1801-1858) atfedilir. Rudolf Virchow (1821–1902) histopatolojinin babası olarak anılır.

Histoloji terimi , 1819'da anatomist Franz Josef Carl Mayer (1787-1865) tarafından başka sözcüklerle ifade edildi ve anatominin bir dalı olarak görüldü . 1830'da Vincent Jaques Louis Chevalier (1770-1841) ve oğlu Charles Louis Chevalier (1804-1859) , doku kesme cihazları için mikrotom terimini ortaya attı . Şirketi 1765'ten beri Paris'te bilimsel aletler üretiyordu.

Dijital histoloji

Slaytlar , Tam Slayt Görüntüleri (WSI) olarak adlandırılan şekilde tamamen sayısallaştırılabilir. Bu WSI'ler daha sonra meslektaşları ile paylaşılabilir, algoritmalar tarafından değerlendirilebilir veya örneğin öğretim amacıyla web'de barındırılabilir. Böyle bir projenin bir örneği Pathorama , preci.cloud veya Cytomine'dir.

histolojik teknik

Bir hasta numunesinin veya bir deneyin ince doku ayrıntıları incelenmeden önce dokunun kapsamlı bir işleme tabi tutulması gerekir. Bu yöntemler histolojik bir teknik olarak özetlenir ve çoğunlukla histolojik laboratuvarda biyomedikal analistler veya (V) MTA'lar tarafından gerçekleştirilir .

Histodiagnostik laboratuvarda doku işleme şunları içerir:

  • Dokuyu stabilize etmek için fiksasyon (ana fiksatör: %4 nötr tamponlu formaldehit solüsyonu)
  • makroskopik değerlendirme, anlamlı doku alanlarının kesilmesi . Patolojide tıbbi aktivite ve teşhis sürecinin bir parçası.
  • Kumaşın sıvı parafin ile drenajı ve emprenyesi
  • Dokunun parafin içinde bloke edilmesi: Dokuyu içeren bir parafin blok yapılır.
  • Modern histoloji laboratuvarlarında, doku parçaları "gömme kasetleri" olarak adlandırılır. Bunlarda doku örneği drenaj ve ağdadan geçer. Kaset daha sonra bir ped tabanı görevi görür ve böylece günümüzde çoğu mikrotomun sağlandığı hızlı serbest bırakma çerçevesine kenetlenebilir.
  • Mikrotom üzerinde 2-5 µm kalınlığında kesit üretimi
  • (Kaplı) cam slaytlar üzerine bölümlerin çizilmesi
  • histolojik boyama teknikleri

Hematoksilen-eozin boyama dahil olmak üzere formaldehitle sabitlenmiş, parafine gömülmüş dokunun işlenmesi , dünya çapında rutin patoloji yöntemidir ve numunenin kabulünden tanıya kadar ortalama bir ila iki gün sürer . Klinik-kimyasal laboratuvarın aksine, birçok iş adımının elle gerçekleştirilmesi gerekir. Özellikle mikrotom üzerinde kesitler yapmak büyük bir beceri gerektirir.

Hızlı bölüm muayenesi

Bazı ameliyatlarda cerrah, daha ileri gidebilmesi için ameliyat sırasında çıkarılan doku hakkında bilgiye ihtiyaç duyar. Bu durumda, numunenin bir kısmı yaklaşık on dakika içinde hızlı bir bölüm olarak işlenebilir:

  • Doku tipine bağlı olarak dondurarak (yaklaşık -20 °C) doku stabilizasyonu
  • Bir kriyostat mikrotomu ile 5-10 µm kalınlığında bir bölüm hazırlayın
  • Kaplamalı bir cam slayt üzerinde bölümün çizilmesi
  • Hızlı HE boyama, Paragon boyama veya başka bir hızlı boyama kullanarak boyama
  • mikroskobik tanı

Histolojinin boyama yöntemleri

Son 120 yılda geliştirilmiş sayısız farklı histolojik leke vardır. Çoğu, geçen yüzyılın ilk 30 yılına aittir. Modern histoloji laboratuvarında yönetilebilir sayıda leke oluşturulmuştur. Her şeyden önce, rutin ve genel boyama olarak hematoksilen-eozin boyası (HE boyası) kullanılır. Bunun için çoğunlukla bilgisayar kontrollü boyama makineleri kullanılmaktadır. Ayrıca bazı sorular için özel olarak adlandırılan (çoğunlukla elle) lekelenmeler yapılmaktadır.

Biyolojik boyamanın boyama teorisi, çoğunlukla belirli doku yapılarının belirli boyalara tepki verme yeteneğine dayanır. Hücre yapıları ve dokular, boyaların renklendirme davranışlarına göre bazofilik , asidofilik ve nötrofilik yapılar olarak sınıflandırılır .

Boyama prosesi histokimyasal olarak analiz edilirse, boya molekülündeki yük dağılımları ile ilgili olarak yukarıda açıklanan kimyasal proseslerden difüzyon , elektroadsorbsiyon ve arayüzey adsorpsiyon gibi fiziksel proseslerden oluşan fiziksel-kimyasal proseslerin karmaşık bir resmi ortaya çıkmıştır (ayrıca bakınız Lewis asit-baz kavramı ) ve histolojik yapılar üzerinde.

Ana bağlama kuvveti iyonik bağdır (asidik boyalar bazik proteinlere bağlanır). Histokimyasal yöntemlerde, bir boya sadece bir doku bileşeni ile reaksiyon yoluyla gelişir (örneğin, Prusya mavisi reaksiyonu, periyodik asit-Schiff reaksiyonu). Hücrenin kendi enzimlerinin aktivitesinin renk gelişmesine neden olduğu enzim histokimyasal yöntemler de vardır.

Bu klasik histokimya, 1980'lerden beri immünohistokimya ile desteklenmiştir. Burada, "hücre özelliklerinin" tespiti, bir antijen-antikor reaksiyonuna dayanmaktadır . Çok aşamalı bir teknikte reaksiyon, antijenin (protein) bulunduğu yerde bir renk reaksiyonu yoluyla görünür hale gelir.

Yerinde hibridizasyon, 1990'lardan beri histolojik teşhiste kullanılmaktadır. Burada, belirli nükleotid dizilerinin tespiti, çift ​​sarmallı DNA'nın erimesine ve tek sarmalların (DNA veya RNA ) kendiliğinden bağlanmasına dayanır . Nükleik asit sekansları, yardımıyla görüntülenir problar . Bu problar florokromlarla işaretlenmişse, floresan in situ hibridizasyondan (FISH) söz edilir .

Bu yöntemlerle histodiagnostikte yeni bir bölüm başlamıştır.

Düz kasların histolojik kesiti (HE)
Kurutulmuş kemik , fuksin

Yaygın boyama yöntemleri şunlardır:

Doku türleri

Edebiyat

  • Hans-Christian Burck: Histolojik Teknik. Thieme-Verlag, Stuttgart, ISBN 3-13-314306-9 .
  • Renate Lüllmann-Rauch: cep ders kitabı histolojisi. 2. Baskı. Thieme Verlag, Stuttgart, ISBN 3-13-129242-3 .
  • Benno Romeis: Mikroskobik teknik , 16. baskı 1968. Verlag R. Oldenbourg, Münih.
  • Peter Stanka: İnsan hücreleri ve dokuları. Tıp uzmanları için histoloji üzerine temel metin . 4. baskı 1990, Bochum, Verlag N. Brockmeyer. ISBN 3-88339-785-7 .
  • Schiebler: Histoloji. Springer yayınevi.
  • H. Leonhardt: Histoloji, sitoloji ve insan mikroanatomisi. Thieme yayınevi, Stuttgart.
  • W. Kühnel: Sitoloji, histoloji ve mikroskobik anatomi cep atlası. Thieme yayınevi, Stuttgart.
  • U. Welsch: Ders Kitabı Histolojisi.
  • U. Welsch: Atlas Histolojisi.
  • Werner Tackmann: Histolojinin tekrarı , bölüm 1 hücre ve doku teorisi. 1999, ISBN 3-932723-00-7 ; 'Bölüm 2 organlar ve sistemler. 1999, ISBN 3-932723-01-5 .
  • N. Ulfig: Kısa ders kitabı histolojisi. 2. baskı, Thieme Verlag, Stuttgart, ISBN 3-13-135572-7 .
  • JA Kiernan: Histolojik ve histokimyasal Yöntemler. Arnold, 1999, ISBN 0-7506-4936-4 .
  • Gudrun Lang: Histoteknoloji. Springer, Viyana / New York 2006, ISBN 3-211-33141-7 .
  • M. Hartmann, MA Pabst: Sitoloji, Histoloji ve Mikroskobik Anatomi. Fakültas Verlag, 2009, ISBN 978-3-7089-0348-4 .
  • Georg Dhom: Histopatolojinin Tarihi. Springer, Berlin 2001.
  • Kristian Bosselmann-Cyran: Boyama Yöntemleri. İçinde: Werner E. Gerabek , Bernhard D. Haage, Gundolf Keil , Wolfgang Wegner (ed.): Enzyklopädie Medizingeschichte. De Gruyter, Berlin / New York 2005, ISBN 3-11-015714-4 , sayfa 389 f.

İnternet linkleri

Commons : Histoloji  - görüntülerin, videoların ve ses dosyalarının toplanması
Vikisözlük: Histoloji  - anlam açıklamaları, kelime kökenleri, eş anlamlılar, çeviriler
Vikikitaplar: Patoloji  - Öğrenme ve Öğretme Materyalleri

Bireysel kanıt

  1. ^ Rainer Brömer: Histoloji. İçinde: Werner E. Gerabek , Bernhard D. Haage, Gundolf Keil , Wolfgang Wegner (ed.): Enzyklopädie Medizingeschichte. De Gruyter, Berlin / New York 2005, ISBN 3-11-015714-4 , s. 605 f., Burada: s. 605.
  2. ^ Kristian Bosselmann-Cyran: Boyama yöntemleri. 2005, sayfa 389.
  3. Dieter Gerlach (ed.): Bir öncü olarak histolojik boyama ve mikrofotoğrafçılığın başlangıcı Josef von Gerlach. Harri Deutsch, 1998.
  4. Histolojik boyama tekniğinin gelişimi. CibaZeitschrift, Basel 1943, yıl no.88, s.3074 ve devamı (PDF; 2.4 MB).
  5. Histolojik boyama tekniğinin gelişimi. Ciba dergisi, Basel 1943, yıl No. 88, sayfa 3074 (PDF; 2.4 MB).
  6. August Franz Josef Karl Mayer: Histoloji ve insan vücudunun dokularının yeni bir bölümü hakkında. Bonn 1819.
  7. Tarihsel mikroskoplar .
  8. Araştırma iş akışınızı merkezileştirin | PreciCloud. 6 Eylül 2018'de alındı .