Fiksasyon (hazırlama yöntemi)
Gelen biyoloji ve tıpta , özellikle patoloji , sabitleme belirtir yapılarının korunması histolojik veya anatomik daha araştırmaları için nesne. Kullanılan fiksatifler, bu şekilde üretilen preparasyonun daha fazla kullanımına bağlıdır.
yöntemler
| yöntem | Kapsam örneği | Prosedürün detayları |
|---|---|---|
| formaldehit , paraformaldehit | Anatominin yanı sıra geleneksel histoloji ve immünohistoloji | 40 g / L tamponlu formaldehit solüsyonunda bekletme. Formaldehit, bir denatüran görevi görür , örn. B. formalin veya Bouin solüsyonu ile . |
| kriyoprezervasyon | Hızlı kesim | -30 ° C civarında donma, örneğin kuru buz ile |
| Alkoller (örneğin metanol veya etanol ), aseton veya dietil eter | sitodiagnostik | Yer değiştirmesi , hücre içi su ile ıslatılması ve eş zamanlı denatürasyon. Genellikle yer değiştiricinin sulu bir solüsyonu kullanılır, solüsyonun konsantrasyonu kademeli olarak arttırılır ve sonunda %100 fiksatif kullanılır. |
| Glutaraldehit gibi çapraz bağlama maddeleri | Transmisyon elektron mikroskobu , bronzlaşma | Kontrast madde olarak çoğunlukla osmiyum tetroksit , uranil asetat veya tungstofosforik asit kullanılır . |
| sıcaklık | mikrobiyoloji | Müstahzarın bir alevle ısıtılması (örneğin, bir Bunsen brülörünün alevi ) veya mikrodalgalar kullanılarak |
| renk tutan sabitleme çözümleri | makroskopik hazırlık | Örneğin Jores I çözümü, Kaiserling I çözümü, Romhànyische çözümü ve diğer çözümler. |
| Tuzlar arasında ağır metaller | Histoloji, bronzlaşma | Zayıf çözünür protein tuzlarının oluşumu, örn. B. krom tabaklamada veya Hollande'a göre bakır tuzları veya Zenker'e göre cıva tuzları ile fiksasyonda |
Mikroskopide fiksasyon sırasında incelenecek malzeme lamın camına sabitlenir. Bu amaçla, nesnenin proteinler ve polimerik karbonhidratlar ( sümüksü ) gibi organik maddelerinin nesneyi cam yüzeye yapıştıracak şekilde değiştirildiği ısıtma kullanılabilir ( ısı sabitleme ). Formaldehit gibi belirli kimyasalların etkisi , nesnenin polimerik bileşenlerini ( örneğin denatürasyon ) nesneyi cam yüzeye yapıştıracak şekilde değiştirebilir. Ne zaman mikroorganizmalar bulaşmış olan bir cam slayt üzerinde, genellikle büyük ölçüde sabitleme ile öldürülür. Sadece sabitlemeden sonra, gerekirse, nesnelerin yapılarını vurgulamak için renklendirilir, çünkü nesneler artık bu kadar kolay durulanamaz ve yapıları artık renklendirme işlemi ile artık o kadar kolay değiştirilemez. Fiksasyona her zaman otolizi azaltan denatürasyon eşlik eder . Mikroseksiyondan önce , parafin ile fiksasyondan sonra biyolojik bir doku gömülür. bu bir FFPE dokusu oluşturur .
Bütün hayvanlar veya parçaları, kan damarlarına infüzyon veya enjeksiyon yoluyla sabitlendiğinde , perfüzyon da kullanılır, örn. B. Thiel fiksasyonunda . Walter Thiel'e göre fiksasyon için borik asit , etilen glikol , amonyum ve potasyum nitrat, klorokresol , sodyum sülfit ve formaldehit içeren bir tespit çözeltisi kullanılır. Sonraki depolama daha seyreltik bir solüsyonda ( varil solüsyonu ) gerçekleşir.
Olarak immünoloji , bir tespit etkilerinin geri alma işlemi olarak adlandırılır antijeninin ortaya çıkartılması . Biyomoleküllerin formaldehit ile çapraz bağlanması ve modifikasyonu, ısıtılarak veya bazlar eklenerek tersine çevrilebilir.
Anatomide fiksasyon
Gelen anatomi hem bütün vücudu, hem de bireysel kutu gövdeleri sabittir. Özellikle makroskopik anatomide bu vücut donörleri ile mümkündür . Bu tür müstahzarlar daha sonra tıp eğitimi için hazırlık kurslarında kullanılır . Metanalın makroskopik anatomi (insan tıbbı) ile ilgili sabitleme özelliklerinin ilk açıklaması 1894'te F. Blum tarafından yapılmıştır. Dokunun “sert, yumuşak agrega durumundan çok daha dirençli, daha sert bir modifikasyona” geçişini gözlemledi . Bunu önce kendi derisiyle teması ve ardından epidermisin sertleşmesi yoluyla fark etti . Daha sonra bir gece formaldehit içine bir "şarbon faresi" koydu ve sonra bunun bir alkol müstahzarı gibi hissettirdiğini buldu . Blum ayrıca 10 kat seyreltmenin (başlangıç değeri: %40 çözelti) daha büyük dokularda bile etanolden daha hızlı sertleştiğini açıkladı . Makroskopik olarak, doku etanol ile tedaviden sonra daha iyi korunurken, önemli bir büzülme görülmedi. In beyinde , beyaz ve gri madde bile açıkça ayırt edilebilir. Dehidrasyon ve seloit mikroskobuna gömme işleminden sonra, histolojik boyamaya duyarlılık günler sonra bile hala saptanabiliyordu. Blum, beyin ve omurilik üzerindeki eylemleri gerçekleştiren Weigert ile işbirliği yaparken, Blum diğer organların işlenmesini kendisi gerçekleştirdi. Meister, Lucius ve Brüning zu Höchst a. M. (bugünkü Sanofi SA ) "Formol" (ürün adı) ürününe dikkat çekmiş ve incelemesi için Blum'a vermiştir. Pratisyen doktor F. Blum'un babası, kıdemli öğretmen J. Blum, 1893'te zoolojik ve botanik müstahzarları korumak için ilk kez formaldehit kullandı. Günümüzde formaldehit en yaygın olarak kullanılan fiksatif ve koruyucudur. Günümüzün yöntemleri genellikle hala formalin yöntemine dayanmaktadır, ancak bir cesedi zapt etmek için başka yöntemler de mevcuttur. Özellikle, hareketli ve sıklıkla renk tutucu sabitlemeler , son derece gerçekçi değerleri nedeniyle tıp eğitimi ve öğretiminin odağına giderek daha fazla taşınmaktadır. En iyi bilinen çözümler , Thiel çözeltisinin yanı sıra alkol ve tuz çözeltileri olarak adlandırılan çözeltileri içerir .
Edebiyat
- Maria Mulisch, Ulrich Welsch (ed.): Romeis mikroskobik tekniği. 18. baskı. Spektrum Akademik Yayınevi, Heidelberg 2010, ISBN 978-3-8274-1676-6 . ( Google Kitap aramasında sınırlı önizleme )
- Gudrun Lang: Histoteknoloji. Springer-Verlag, 2013, ISBN 978-3-7091-1190-1 . Bölüm 5: Fiksasyon.
- Siegfried Schwerin: Anatomik kuru, yaş ve kemik preparatları. Springer-Verlag, 1952, ISBN 978-3-662-30466-2 .
- Walter F. Steinmann: Tıpta makroskobik hazırlama yöntemleri. Thieme-Verlag, 1982, ISBN 3-13-623901-6 .
Bireysel kanıt
- ^ Bir B Mareike Dartsch: erkek idrar sisteminin bir parçası olarak ventral Vezikoüretral süspansiyon cihazı. tez . Leipzig Üniversitesi Tıp Fakültesi, 2012, s. 35.
- ^ H. Fraenkel-Conrat, BA Brandon, HS Olcott: Formaldehitin proteinlerle reaksiyonu; indol gruplarının katılımı; gramisidin. İçinde: Biyolojik Kimya Dergisi. Cilt 168, Sayı 1, Nisan 1947, ISSN 0021-9258 , s. 99-118. PMID 20291066 .
- ↑ H. Fraenkel-Conrat, HS Olcott: Formaldehitin proteinlerle reaksiyonu; amino ve birincil amid veya guanidil grupları arasında çapraz bağlanma. İçinde: Amerikan Kimya Derneği Dergisi. Cilt 70, Sayı 8, Ağustos 1948, ISSN 0002-7863 , s. 2673-2684. PMID 18876976 .
- ↑ H. Fraenkel-Conrat, HS Olcott: Formaldehitin proteinlerle reaksiyonu; amino gruplarının fenol, imidazol veya indol gruplarıyla çapraz bağlanması. İçinde: Biyolojik Kimya Dergisi. Cilt 174, Sayı 3, Temmuz 1948, ISSN 0021-9258 , s. 827-843. PMID 18871242 .
- ↑ F. Blum: Sertleştirici ve koruyucu olarak formaldehit (formol) kullanımına ilişkin not. İçinde: Anat. 9, 1894, sayfa 229-231.
- ↑ F. Blum: Sertleştirici ajan olarak formaldehit. İçinde: Zschr.f. Mikro. ve mikrosk. Teknoloji 10, 1896, sayfa 314-315.
- ↑ J. Blum: Koruma sıvısı olarak Formol. İçinde: Zool. Numara 10, 1893, sayfa 450-452.
- ↑ Reinhard Hildebrand: Formalin. İçinde: Werner E. Gerabek , Bernhard D. Haage, Gundolf Keil , Wolfgang Wegner (ed.): Enzyklopädie Medizingeschichte. Cilt 1: AG. Walter de Gruyter, Berlin / New York 2007, ISBN 978-3-11-019703-7 , s. 410.
- ↑ S. Hayashi ve diğerleri.: Doymuş tuz çözeltisi yöntemi: Cerrahi beceri eğitimi için yararlı bir kadavra mumyalama. İçinde: Tıp Baltimore. Cilt 93, Sayı 27, 2014, sayfa 196-197. ISSN 0025-7974
- ^ R. Coleman, I. Kogan: Anatomi öğretimi için kadavraları korumak için geliştirilmiş düşük formaldehitli mumyalama sıvısı. İçinde: J. Anat.192, 1998, s. 443-446.
- ↑ J. Weigner: Öğretim ve araştırma için organların ve hayvan bedenlerinin sabitlenmesi ve korunması için nitrit kürleme tuzu-etanol-polietilen glikol 400 çözeltisi. İçinde: Taksidermist. Cilt 57, 2011, sayfa 34-53, ISSN 0032-6542
- ↑ W. Thiel: Tüm cesetlerin doğal renklerde korunması. İçinde: Anne. Anat. 174, 1992, s. 185-195.