Oksidaz testi

Oksidaz testi saptanması için basit ve hızlı bir biyokimyasal yöntemdir enzim sitokrom c oksidazı olarak solunum zinciri ve hücreler . Oksidaz testi, bakterilerin sınıflandırılmasında ( Bunte serisi ) ve histolojide kullanılır . Oksidaz reaktifi , sitokrom c yoluyla sitokrom c oksidazı azaltır . Bu durumda, renksiz reaktif, yoğun şekilde renkli bir radikal - katyon oksitlenmiş (Wurster katyonu) haline gelir .

Oksidaz testi, sitokrom c oksidazlara özgüdür . Kinol oksidazlar burada reaksiyona girmez.

Oksidaz reaktifleri

Üç farklı oksidaz reaktifi vardır:

Kovacs reaktifi

Kovacs, reaktif 10 bir çözüm mg / ml N , N , N ' N ' -tetrametil-1,4-fenilendiamin , 100 mM fosfat tamponu (pH 7) içerisinde (TMPD). Reaktifin eklenmesinden sonraki bir dakika içinde hücreler yoğun bir mavi renge (Wurster mavisi) dönüşürse bir bakteri oksidaz pozitiftir. Reaksiyon yoksa veya daha sonra reaksiyona girerse, bakteri oksidaz negatiftir.

Gordon-McLeod reaktifi

Gordon-McLeod reaktifi, 100 mM fosfat tamponunda (pH 7) 10 mg / ml N , N -dimetil-1,4-fenilendiamin (DMPD) solüsyonudur. Reaktifin eklenmesinden sonraki bir dakika içinde hücreler yoğun bir kırmızı renge (Wurster kırmızısı) dönüşürse, bakteri oksidaz pozitiftir. Reaksiyon yoksa veya daha sonra reaksiyona girerse, bakteri oksidaz negatiftir.

NADI reaktifi

NADI reaktif göre ( Ehrlich ) 50 mm'lik hacim olarak eşit bir karışımıdır; α-naftol etanol hacmi ve mg / ml ile 10 ile% 50 çözelti , N , N- dimetil-1,4-fenilendiamin çözeltisi (DMPD ) % 100 mM fosfat tamponunda (pH 7). Hücreler bir dakika içinde yoğun bir mavi renge ( indofenol mavisi ) dönüşürse bir bakteri oksidaz pozitiftir . Reaksiyon yoksa veya daha sonra reaksiyona girerse, bakteri oksidaz negatiftir.

Edebiyat

  1. ↑ N. Kovacs (1956): Pseudomonas pyocyanea'nın oksidaz reaksiyonu ile tanımlanması. İçinde: Doğa. Cilt 178, s. 703. PMID 13369512 doi : 10.1038 / 178703a0
  2. ^ JC Gordon & JW McLeod (1928): Bakteriyolojide doğrudan oksidaz reaksiyonunun pratik uygulaması. İçinde: J. Path. Bact. Cilt 31, sayfa 185.
  3. ^ CM Carpenter ve diğerleri. (1947): Oksidaz testi için geliştirilmiş bir reaktif olan p-aminodimetilanilinin oksalat tuzu. İçinde: Bilim. Cilt 105, s. 649-650. doi : 10.1126 / science.105.2738.649
  4. ^ WL Gaby ve C. Hadley (1957): Pseudomonas aeruginosa'nın tanımlanması için pratik laboratuvar testi. In: J. Bacteriology. Cilt 74, sayfa 356-358. PMID 13475249 , PMC 314647 (ücretsiz tam metin).
  5. ↑ P. Ehrlich (1885): Organizmanın oksijen ihtiyacı. Bir renk analitik çalışması. Habilitasyon tezi, Berlin Üniversitesi.