Rekombinant protein

Rekombinant proteinler , genetiği değiştirilmiş organizmaların yardımıyla veya geçici olarak transfekte edilmiş hücre kültürleri ile üretilmiş , biyoteknolojik olarak üretilmiş proteinlerdir .

özellikleri

Genetik mühendisliğinin gelişmesiyle birlikte, yabancı proteinlerin, özellikle insülin veya aşı gibi farmasötik proteinlerin üretimi için çok sayıda bakteri organizması , mantar , böcek veya memeli hücresi kullanıldı . Böyle bir üretim için tercih edilen sistemler, bağırsak bakteri Escherichia coli , çeşitli maya türleri veya böcek veya memeli hücrelerinin hücre dizileridir .

Proteinlerin genetik üretimi için kullanılan bir sistem çeşitli gereksinimleri karşılamalıdır: Büyük fermentörlerde olabildiğince ucuza hızla büyüyebilmelidir. Doğru post-translasyonel modifikasyonlarla istenen maddeleri verimli bir şekilde üretmeli ve mümkünse bunları kültür ortamına boşaltmalıdır ( salgılamalıdır ). Özellikle farmasötik ürünlerin üretimi için yüksek güvenlik gereksinimlerini karşılamalı ve proteinleri otantik, tercihen "insan" formunda üretmelidir.

Prosedür

Çoğu zaman, protein için genetik bilgi bir vektöre klonlanır, örn. B. daha sonra konakçı organizmaya dönüştürülen veya transfekte edilen bir plazmid . Rekombinant proteinin özellikleri, protein mühendisliği yoluyla uyarlanabilir. Vektör tasarım vektör özelleştirme için izin verir.

Sonra , bir transgen edilmiş klonlanmış ( insert bir vektör içine), rekombinant DNA üretilen sokulur bir organizmaya. Bazen, bir hücre kültürü için genetik olarak özdeş bir başlangıç ​​noktası olarak seyreltme klonlamasını sınırlayarak bir klon izole edilir . Haberci genler bazen bir transgenik klonun tanımlanmasını kolaylaştırmak için kullanılır. Rekombinant proteinin müteakip aşırı ekspresyonu , orijinal organizmada bulunanlardan daha yüksek verime izin verir. Vektördeki seçim markörleri , sadece transgenik organizmaların seçici büyümesine izin verirken, vektörü transgenle taşımayan organizmalar büyüyemez.

Organizmaları toksik olan proteinler için , kullanılan indüklenebilir promoterler , hücrelerin büyümesine , gen ekspresyonunun indüksiyonuna izin verir. Toksik genlerin bir büyüme fazı indüklendikten sonra, hücreler "toplanır" ve sindirilen proteaz inhibitörlerinin eklenmesi . Sırasında protein saflaştırma , arzu edilen protein, hücre proteinlerinin ve diğer ayrılır biyomoleküllerin ve daha sonra , özelliği . Genellikle proteolize edilebilir protein etiketleri , temizleme ve saptama için kullanılır ve bunlar daha sonra ayrılır.

Edebiyat